氣相色譜法測定無極膏中薄荷腦，樟腦和水楊酸甲酯的含量

摘要：目的：建立氣相色譜法測定無極膏中薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯的含量。方法：以聚乙二醇一20M 為固定液相，涂布濃度為10％ ，柱溫為140℃ ，氫火焰離子化檢測器，檢測器溫度為260℃ 。結果：3組分GC法測定的分離度和線性關系良好，回收率分別為薄荷腦100．17％ ，RSD =0．661％ ；樟腦99．89％ ，RSD =0．600％ ；水楊酸甲酯100．17％ ，RSD =0．553％ 。結論：本法靈敏、快速、準確，可作為無極膏的質量控制標準。
中圖分類號：R927．2 文獻標識碼：A 文章編號：1001—1528（2003）11—0879—03

Determ ination of menthol， camphor and methyIsaIicyIate in Cremor-M entholi
Com positus by GC
WU Qlong—zhu， DAI Yong—jian， LIU W ei—wei
（Na ing Military Medical C~dlege，Second Military Medical Uniwersity，Nan3ing 210099，China）
Key words：Crem or M entholi Com positus；determ ination；GC ；menthol；camphor；m ethylsalicylate
Abstract：Objective：To establish a GC method for determination of menthol，camphor and methylsalicylate in Cremor M entholi Com positus．M ethods：The determ ination was carried out on a PEG一20M stainless steel column with temperature at 140℃．FID detector with temperature at 260℃ ．Results：The separating degree and the linearity were fine with the average recovery of menthol 100．17％ ， RSD = 0．661％ ；cam phor 99．89％ ，RSD = 0．600％ ；methylsalicylate 100．17％ ，R SD = 0．553％ ，respectively．Conclusions：The method is convenient，rapid and accurate． It can be used to control the quality of this preparation．

    無極膏為衛生部部頒標準收載的復方制劑，具有抗炎、抗菌、鎮痛和局麻作用，l臨床上用于蟲咬皮炎、神經性皮炎、濕疹等皮膚病，療效顯著。原質量標準的含量測定方法為對總揮發油的測定，而對主要成分薄荷腦、樟腦和水楊酸甲酯只進行鑒別，為了使無極膏的質量控制方法進一步完善，本文應用GC法同時測定薄荷腦、樟腦和水楊酸甲酯3組份的含量，結果滿意，可作為無極膏的質量控制方法。

1 儀器與試藥：GC-14B型氣相色譜儀，氫火焰離子化檢測器（日本島津），WDL-95色譜工作站（大連化物所）；薄荷腦對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：0728-200005）；樟腦對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：747-200106）；水楊酸甲酯對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：707-200106）；無極膏（漳州無極藥業有限公司，批號：020316，020512，020724）。

2 實驗方法與結果
2，1 色譜條件和系統適用性
2，1．1 色譜條件：色譜柱：不銹鋼填充柱（以聚乙二醇-20M 為固定液相，涂布濃度為l0％）2m×5mm；載氣：高純氮氣（P=50kPa）；氫氣（P=50kPa）；空氣（P=50kPa）；溫度：進樣口：250℃ ：檢測器：260℃ ；色譜柱：140℃ ；進樣量：2μL。
2．1．2 系統適用性：分別取薄荷腦、樟腦和水楊酸甲酯對照品適量，加甲醇溶解并稀釋至一定濃度，吸取2ttL進樣測定，薄荷腦保留時間為3．88min，理論板數為1305；樟腦保留時間為1．24min，理論板數為1258；水楊酸甲酯保留時間為7．10min，理論板數為1627。三者能很好分離，薄荷腦與樟腦的分離度為2．88，薄荷腦與水楊酸甲酯的分離度為5．68。
2．1．3 zui低定量限和zui低檢測限：分別取上述薄荷腦、樟腦和水楊酸甲酯對照品溶液，加入甲醇逐級稀釋，按l0倍和3倍信噪比分別計算zui低定量限和zui低檢測限，結果薄荷腦zui低定量限為7．27,ug/mL ，zui低檢測限為4．36ug/mL ；樟腦zui低定量限為10．15p．g/mL ，zui低檢測限為6．09μg/mL ；水楊酸甲酯zui低定量限為11．88μg/mL ，zui低檢測限為7．13μg/mL 。
2．1．4 輔料干擾試驗：按處方（除薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯外）配制空白基質，取5g，按樣品含量測定項下方法制備空白樣品，進樣測定，結果輔料不干擾測定。
2，2 線性關系：精密稱取薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯對照品各100μg，分別置10mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，得對照品貯備液。分別量取薄荷腦、樟腦、水楊酸甲酯對照品貯備液適量置10mL量瓶中，用甲醇稀釋定量配制成系列標準溶液，取2μL進樣，連續測定2次，求得平均峰面積（A）對濃度（C）的回歸方程和線性范圍分別為：薄荷腦：A = 1．328× 10C + 989．43，r=0．99999，線性范圍0．0997～1．296mg/mL樟腦：A=1．085×100C-1599．16，r=0．9999
線性范圍0．304～1．923mg/mL水楊酸甲酯：A=7．717×10C-331．02，r=0．9999線性范圍0．202～1．008mg/mL。
2．3 精密度試驗：取線性關系項下中間一份溶液，連續進樣6次，記錄峰面積，結果薄荷腦，樟腦及水楊酸甲酯的RSD 分別為0．147％ ，1．144％ 和0．384％ 。
2．4 重復性試驗：取本品（20020316）適量（約相當于薄荷腦175mg、樟腦280mg及水楊酸甲酯150mg），共6份，精密稱定，按樣品含量測定項下方法測定并計算薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯的含量，結果RSD 分別為1．294％ ，1．123％ 和1．066％ 。
2．5 溶液穩定性：取重復性項下的供試品溶液，分別放置一定時間后進樣，記錄峰面積，結果薄荷腦，樟腦及水楊酸甲酯的RSD 分別為0．117％ ，0．894％ 和0．330％ 。說明供試品溶液在12h內穩定。
2．6 回收率試驗：精密稱取薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯對照品各3份（相當于標示量的80％ ，100％ ，120％），置50mL量瓶中，按處方比例加入相應的空白基質，按樣品含量測定項下方法測定，以實測量比加入量分別計算薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯的回收率。
2．7 樣品含量測定：取樣品5g，精密稱定，置50mL量瓶中，加甲醇約30mL，置80℃ 水浴中加熱2min，振搖使溶解，放冷至室溫，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2h以上，取出迅速濾過，放冷至室溫，精密量取續濾液1mL，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，取2μL注入氣相色譜儀，記錄色譜圖；另分別取薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯對照品適量，加甲醇配制成分別含薄荷腦、樟腦及水楊酸甲酯為0．7，1．1，0．6mg/mL溶液，同法測定。按外標法以峰面積計算含量。

3 討論
3．1 制劑中薄荷腦、樟腦、水楊酸甲酯的含量測定方法，文獻報道多為氣相色譜法，但在樣品中同時測定3種成分的方法尚未見報道，本文參照原質量標準中薄荷腦、樟腦、水楊酸甲酯等的氣相色譜鑒別方法建立了3成分的含量測定方法，在此色譜條件下，3種成分能很好分離，薄荷腦與樟腦的分離度為2．88，薄荷腦與水楊酸甲酯的分離度為5．68。
3．2 所建立的GC法靈敏、準確，重現性好，薄荷腦濃度在0．0997～1．296mg/mL；樟腦濃度在0．304～ 1．923mg/mL；水楊酸甲酯濃度在0．202～1．008mg/mL 范圍內與峰面積均呈良好的線性關系，且操作簡便，可同時測定無極膏中3組分的含量。但無極膏中除薄荷腦、樟腦、水楊酸甲酯外，尚含一定量的其它成分，還有待于進一步探討，以完善現行質量標準。


參考文獻：
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