液相色譜法測(cè)定山藥中尿囊素的含量

山藥為薯蕷科植物薯蕷Dioscorea opposita Thunb.的干燥根莖。

［產(chǎn)地］

原產(chǎn)于山西平遙、介休．現(xiàn)主產(chǎn)于河南新鄉(xiāng)地區(qū)的溫縣、孟縣、沁縣、博愛(ài)、武陟等縣，習(xí)稱＂懷山藥＂為道地藥材．是全國(guó)的四大懷藥之一．河北、陜西、江西、廣東等地亦產(chǎn)。

［采收加工］

冬季莖葉枯萎后采挖，切去根頭，洗凈，除去外皮及須根，用硫磺熏后，干燥；也有選擇肥大順直的干燥山藥，置清水中，浸至無(wú)干心，悶透，用硫磺熏后，切齊兩端，用木板搓成圓柱狀，曬干，打光，習(xí)稱＂光山藥＂．在加工是切下斷頭長(zhǎng)寸許的則稱為＂段山＂或＂寸山＂，碎斷次貨稱＂料山＂。

［化學(xué)成分］

塊莖含皂苷、粘液質(zhì)、膽堿、淀粉（１６％）、糖蛋白和自由氨基酸，還含枝杈素（d-abscisinⅡ）、多酚氧化霉、維生素Ｃ（5mg％）、３，４，－二羥基苯乙胺，粘液中含甘露聚糖（mannan）與植酸（phytic acid）．日本薯蕷含薯蕷皂苷（dioscin）,其苷元為薯蕷皂苷元，也是薯蕷屬植物塊莖常有的成分^［１］。

還含膽堿（choline）、脫落素（abscisin）、尿囊素（allantoin）多巴胺、（dopamine）、山藥堿（batatasine）^［２］。

[主要成分理化性質(zhì)和藥理作用]

尿囊素：分子式C₄H₆N₄O₃，分子量158.12，單斜片狀結(jié)晶或棱柱結(jié)晶（水），熔點(diǎn)238℃。Lg溶于190ml水，500ml乙醇，在熱水和熱乙醇中溶解度更大。幾乎不溶于乙醚^[3]。

尿囊素具有鎮(zhèn)靜作用，其里鋁鹽有除臭及收斂作用。

[含量測(cè)定]

山藥中尿囊素的含量測(cè)定^[4]

[色譜條件]

色譜柱：Zorbax ODS C₁₈（250mm×4.6mm），保護(hù)柱：Zorbax ODS （20mm×2.0mm）；流動(dòng)相：甲醇-氯仿-水（0.5∶0.012∶100）；流速：0.5ml/min；檢測(cè)波長(zhǎng)：224nm；柱溫：35℃。

[供試品的制備]

取本品粉末約0.5g，精密稱定，加水1ml潤(rùn)濕，加甲醇7ml，超聲20min定容，振蕩，于4℃靜置，沉淀糖類、淀粉、蛋白質(zhì)等醇不溶物，吸取上清液0.5ml，揮去甲醇，用純水0.5ml與40℃超聲或振蕩溶解尿囊素，高速離心10min，吸取0.2ml用甲醇再生，并以純水平衡的Sep pak C₁₈小柱，用純水3ml       洗滌，濾過(guò)，濾液定容至5ml，取部分溶液與4000轉(zhuǎn)/min。按本法色譜條件進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)下圖

a對(duì)照品；b樣品；1尿囊素

[討論]

根據(jù)尿囊素溶于熱水和甲醇的性質(zhì)，本法設(shè)計(jì)了用水溶解后加甲醇提取尿囊素和蛋白質(zhì)、淀粉、糖，同時(shí)樣品制備的方法。繼而以水取代提取液中甲醇，除去水不溶物，再將樣品的水溶液通過(guò)C₁₈

小柱凈化，尿囊素獲較好的回收，而流動(dòng)相較難洗提的中草藥中的成分則留于C₁₈小柱上端，避免了對(duì)尿囊素測(cè)定的干擾，簡(jiǎn)化了樣品前處理步驟以獲得準(zhǔn)確可靠的結(jié)果。

參考文獻(xiàn)

1.       江蘇新醫(yī)學(xué)院編，中藥大辭典，上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1984

2.       沙世炎，徐禮焱編，中草藥有效沉浮分析法，北京：人民衛(wèi)生出版社，1986

3.       國(guó)家醫(yī)要管理局中草藥情報(bào)中心站編，植物藥有效成分手冊(cè)，北京：人民衛(wèi)生出版社，1986

4.       宋金春，楊芝，羅順德等，反相液相色譜測(cè)定山藥中尿囊素的含量，中國(guó)醫(yī)院藥學(xué)雜志，2001，21（7）：413